segunda-feira, 26 de setembro de 2011

Extremófila x Replicação DNA em manipulação genética

   70 a 80ºC é o ambiente térmico onde encontramos extremófilas. Essas bactérias conseguem manter seu ciclo proliferativo em altas temperaturas e os cientistas possuem interesse nelas pelo fato de estarem envolvidas nas terapias gênicas, ou pelo menos uma delas, cujas pequeninas são as Thermus thermophilus, eubactérias gram negativas. O organismo também foi encontrado a ser importante na degradação de materiais orgânicos. As cepas mais comuns são as HB8 e HB27 em suas análises biotecnológicas.


Thermus thermophilus (HB8)





Thermus thermophilus (HB8)














   


Enfim, essas pequeninas são utilizadas para isolamento da DNA Polimerase (principal complexo responsável pela replicação do DNA) e usadas consequentemente em aplicações PCR (Reação em cadeia da polimerase), onde as sequências gênicas serão copiadas e trabalhadas na área que se deseja aplicar, como na tradução de uma proteína da sequencia específica, ou no simples mapeamento, diagnóstico de doenças hereditárias, síntese de organismos transgênicos, enfim, as aplicações biotecnológicas são demasiadas.



     * Análise estrutural da ras-like proteína G de mgla e seus cognatos mglb gap e as implicações para a polaridade bacteriana de Thermus thermophilus (HB8).
  Pelo banco de dados da NCBI e visualizado pelo cn3d. Miertzschke M, C Koerner, Vetter IR, Keilberg D, E Hot, Leonardy S, L Sogaard-Andersen, A Wittinghofer
Embo J. (em 22 de julho de 2011).



Desta forma, a engenharia genética decorreu a utilizar esta bactéria como fonte do isolamento da sequência gênica que se deseja, através da enzima descrita. É óbvio que não é tão fácil assim. Listaremos os eventos para a enfim utilização da DNA Polimerase:
     1) Utilização de enzimas de restrição que são endonucleares, com a capacidade de clivarem da sequêcia de genes específicas para os devidos procedimentos;
     2) Técnica do DNA recombinante, que irá recombinar as sequências que se desejam formar, por exemplo, inserir o gene para o alelo olhos vermelhos em moscas drosofilas em um alelo cor preto para o mesmo slot olhos;
     3) Replicação e cultura do material genético formado num organismo hospedeiro;
     4) Técnica do DNA complementar, que retira os íntrons dos éxons (que são, respectivamente, sequencia transcriptiva e não transcriptiva, se posso assim dizer), tornando o genoma maduro;
     5) Criação do mRNA a partir do código genético;
     6) Emprego da enzima transcriptase reversa para recodificação do mRNA em DNA;
     7) Uso de RNAses para degradação do mRNA e isolamento do DNA;
     8) Agora sim! A DNA Polimerase poderá replicar a macromolécula de DNA isolada.

   A pergunta que aposto que não quer calar: Mas vocês mensionaram apenas a utilização de uma bactéria e um enorme trabalho pra isolar a DNA Polimerase e proceder em apenas um dos eventos da síntese de uma nova molécula de DNA, por que?
   Para demonstrar o quão a ciência é enternecida e impressionante. Somente os pesquisadores que investem quase a vida toda em laboratórios para aumentar uma pequena fração de dados para uma possível ampliação de uma provável e gigante descoberta, sabem na prática o que é o martírio da perseverança da pesquisa teórica/prática. Olhares superficiais humanos não vêem que de simples e microscópicos seres podem desfrutar de descobertas surpreendentes aos avanços humanos e que o conhecimento vem progressivamente e não em torrente.


 Thank you to http://www.thermus.org/e_thermus_EM.htm

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